--高速冷冻离心机（最高离心力达15 000 g 以上）；
--生物安全柜；
--混匀器；
--冰箱（2℃～8℃，-20℃，-80℃）；
--微量可调移液器（10 μL， 100 μL， 1000 μL）；
--微量带滤芯吸嘴（10 μL， 100 μL， 1000 μL）；
--灭菌研钵；
--离心管；
--PCR光学反应管。
4.2 试剂
4.2.1 试剂级别
除另有规定，本方法试验用水应符合GB/T 6682规定的二级水，所用化学试剂均为分析纯。
4.2.2 引物与探针
上游引物pH1N1（2009）F序列为：5''- CAA CAC CAA CTT TGC TGC-3''，下游引物pH1N1（2009）R序列为：5''-GGA ACC GAT TCT TA（C/T） ACT GTT GTC-3''，TaqMan探针pH1N1（2009）Pb序列为：5'' -CAG TCA GTG GTT TCC GTG AAA TTA GC-3''，其5’端和3’端分别标记FAM和BHQ，或者可以选择标记其它荧光基团及其相应的淬灭基团。采用无DNA酶、无RNA酶水将每条引物与探针配制成100 μmol/L储存液，置-20℃或更低温度冻存。使用时取适量配制成10 μmol/L工作液，避免多次冻融。
4.2.3 一步法实时荧光RT-PCR检测试剂盒。
4.2.4 阳性对照为灭活疫苗，-20℃保存备用。阴性对照样品可采用健康的动物组织材料，空白对照样品为试剂盒本身试剂不加模板。
4.2.5 其他试剂
--DEPC水（按照附录A制备，推荐使用商品化DEPC处理的无DNA酶和RNA酶的水）；
--三氯甲烷；
--异丙醇；
--无水乙醇；
--70％ 乙醇（用新开启的灭菌双蒸水配制，-20℃预冷）；
--0.01 mol/L PBS（pH7.0～7.4，配制方法见附录A）。
5 生物安全要求
5.1 样品采集、样品处理及检测过程所涉及的实验操作，应参照 GB 19489的规定进行。
5.2 pH1N1（2009） 实时荧光RT-PCR检测应符合SN/T 1193（基因检验实验室技术要求）的相关要求。
6 样品采集和前处理
6.1 样品采集
6.1.1 一般要求
样品的采集、保存及运输应符合GB/T 18088、GB/T18936和 GB19442的相关要求。
6.1.2 猪的相关病毒样品采集
