无论是否进行流感快速诊断试剂盒检测和RT-PCR检测,都应进行常规的流感病毒分离鉴定。尤其是流感快速诊断试剂盒检测和RT-PCR检测阳性的标本,应尽量分离到流感病毒。
血清学检测在流感样病例暴发疫情中仅作为一种推荐方法,供有条件的地区使用。
(2)实验室检测方法
病毒分离鉴定是流感实验室诊断中最常用、高度敏感、最准确的方法之一,所分离到的病毒可长期保存,并可进行抗原性、基因特性分析。因此,常规用于暴发疫情实验室检测。
RT-PCR法和Real-time PCR法是检测流感病毒核酸的方法,能检测出非常低水平的流感病毒的核酸,不管病毒是否具有活性均可进行测定。可选择鉴定流感病毒的A型通用引物、B型引物和能区分A型流感病毒不同亚型的引物同时进行试验。
流感快速诊断试剂盒可检测流感病毒的NP抗原和M1抗原,用于暴发疫情中流感样病例咽、鼻拭子或含漱液标本的快速检测。此方法能在30min内提供检测结果,初步判断疫情性质,可在现场中使用,操作简便。
快速诊断试剂盒检测比病毒分离培养和RT-PCR的敏感性低,无法确定流感病毒的亚型,部分试剂盒不能区分A型或B型流感病毒,无法获得毒株及其分子生物学和抗原特征的信息。但鉴于其特异性高,用于流感样病例暴发疫情检测。虽然阴性结果尚不能排除流感,但阳性结果可高度提示疫情性质。
病例的急性期和恢复期双份血清,可采用本起暴发的分离株或国家流感中心每年提供的4种标准参照抗原进行HI试验。如果恢复期血清特异性抗体较急性期增高4倍或以上,方可进行诊断。
如果仅采集到病例的单份血清,可在相邻无流感暴发的地区,采集相应对照人群(50人份以上)的血清,进行HI试验,以推断暴发流行的病因。
对于流感样暴发疫情,不能诊断为流感的,有条件的要开展其他病原的实验室检测工作,以明确病原学病因。
4、检测结果的报告
各级疾病预防控制机构流感实验室接到标本后,应进行相应的流感快速诊断试剂盒检测、RT-PCR和Real-time PCR检测。完成试验后,应在24h内分别将检测结果录入到“中国流感监测信息系统”中的“流感暴发疫情快诊试剂盒检测结果一览表”(表11)和“流感暴发疫情核酸检测结果一览表”(表12)中。省疾病预防控制中心流感实验室完成病毒分离鉴定后将结果录入到“流感监测病毒分离鉴定结果登记一览表”(表5)。
5、毒株的保存管理
省疾病预防控制中心流感实验室要对所有自暴发疫情中分离的流感毒株进行登记,填写“流感毒株保存记录表”(表6),以备复核。
6、毒株的上送
省疾病预防控制中心流感实验室在完成HI试验后,填写“流感毒株送检单”,每2周将所有自流感样病例暴发疫情中分离到的毒株送至国家流感中心,监测网络中的市级实验室寄送检毒株时,同时送各省级疾控中心流感实验室备份。
其中HA阳性,而用国家流感中心提供的标准参照血清,HI效价均≤20的毒株,应在HI试验结束后24h内送达国家流感中心。
所送毒株每份应不少于3mL,HA滴度≥8,并且无细菌污染。
(三)疫情性质判断原则
1、单个病例的诊断按照国家流行性感冒诊断标准进行。
2、暴发疫情的性质应结合病例的临床、流行病学和实验室检测结果进行综合分析、判断。
(四)疫情控制
1、隔离病人
(1)对发热(体温≥38℃),或≥37.5℃伴畏寒、咳嗽头痛、肌肉酸痛者,应严格实行隔离医学观察至少7天,医学观察期间不得参加集体活动,不得进入公共场所。疫情发生单位指派人员配合当地卫生部门追踪记录其转归情况。
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