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附件6 非典型肺炎病例实验室检测标本采集技术指南(试行)
一、病毒分离标本的采集与运送
1、采集
病毒分离成功的关键取决于采集标本的质量，及其保存运输等环节。为提高病毒的分离率，在发病早期，可每天采集1份咽拭子，采集多份痰液。
（1）鼻咽拭子：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签头浸入含4～5ml样本运输液的螺口试管中，尾部弃去。
（2）痰液：让病人将痰液咳入无菌平皿中，然后用棉签刮取痰液放入含4～5ml样本运输液的螺口试管中。
（3）嗽口液：用10ml洗液嗽口。
（4）尸检标本：取肺、肝、肾、心、淋巴结、血凝块等组织2厘米×2厘米大小，置于10螺口试管中。每种组织需要5～10管。
2、标本保存上送
标本采集后应立即冷冻保存，如未能及时接种应置－70℃或以下保存。常用的样品运输液为：pH7.4～7.6的Hank's，Eagle's或水解乳蛋白液。
为防止细菌和真菌生长，在采样液中需加入青、链霉素，终浓度为每毫升1000单位青霉素和100μg的链霉素，（也可用庆大霉素，其终浓度为每毫升1mg，）同时加制霉菌素，终浓度为每毫升4μg。
二、细菌培养标本的采集与运送
1、采集
细菌培养标本最好在抗感染治疗之前采集，可采集咽拭子或痰液。
1)咽拭子：用无菌湿棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，再将棉签放入无菌试管中。
2)痰液：让病人直接将痰液咳入无菌平皿中。
2、保存运送
做细菌分离培养的样本密封好常温下2小时内送检。
三、血清标本采集与运送
1、采集
须采集病例的急性期和恢复期血清：
1）尽早采集急性期血样，最迟不晚于发病后7天。恢复期血样则在发病后2～4周采集。
2）无菌采集5ml血液标本，分离血清，冷冻。
3）详细登记有关病例的姓名、性别、年龄等基本信息，发病日期、采样日期等。
2、运送保管
1）血清标本应带冰在24小时内运送至实验室。应分装多管冷冻保存。
2）标本至实验室后，病毒分离标本应尽快进行接种分离，48h内能进行接种的可置于4℃保存，如未能接种应置－70℃或以下保存。
3）血清标本可在4℃存放一周，长期保存置－20℃或以下。
四、实验室安全指南
样本检验采取就地检验的原则，当地医院能开展的项目在当地检测，同时将血清样本和咽拭子等相关样本送当地疾控中心检验。
病原分离检测必须在II级生物安全实验室内，严格按照无菌操作和生物安全防护原则进行。
附件7 病人住所及公共场所的消毒(试行)
1、对住过病人的房间应及时进行空气消毒和物体表面的消毒。可用15%过氧乙酸7ml(1g/立方米)熏蒸2小时，或用2%过氧乙酸按8ml/立方米气溶胶喷雾消毒1小时。消毒结束后进行通风换气。
2、对住过病人的楼层走道的墙壁、地面和所有公用电梯、楼梯用1000mg/L含氯消毒剂溶液按100ml/平方米喷雾2遍，作用30分钟后对易腐蚀、褪色的部位可用清水清洗或擦拭。
3、对病人使用过的会议室、娱乐室及大厅、走道等场所应尽可能长时间地开窗通风换气。必要时可用过氧乙酸进行空气和物体表面消毒(方法同房间)。
4、对可能受污染的床上用品、毛巾可用250mg/L－500mg/L含氯消毒剂溶液浸泡30分钟。对家具、日常用品等物体的表面可用1000mg/L含氯消毒剂溶液擦拭消毒。30分钟后用清水清洗或擦拭。
