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动植物检疫局关于进境鸵鸟检疫有关问题的通知

  抗原的血凝滴度是凡能使1%的鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数;因此,
能使红细胞完全凝集的最高稀释倍数的病毒液25ul称为1个血凝单位(HA)。如该抗
原的血凝单位为1∶128/25ul。
  在进行禽副粘病毒血凝抑制试验时,病毒的工作浓度应为4HA。因为该试验的抗
原的血凝单位为1∶128/25ul,按其孔号数(孔7)倒退2孔的稀释倍数(孔5,1∶16),作为该病毒的工作浓度:1∶32/25u1。
  2.血凝抑制试验(HI):
  取干净的微量滴定板(V型)一块,按表二进行操作:每孔加25ul生理盐水,孔
1加待检血清25ul,用移液器反复吹打混匀三次;吸出25ul于孔2,吹打混匀后吸出25ul于孔3;如此依次稀释到孔8,孔8混匀后吸出25ul弃掉。孔9作为阳性血清对照,孔10作为阴性血清对照,孔11不加任何血清而作为抗原对照,孔12不加抗原和任何血清,只加生理盐水作空白对照。各孔加入1%的红细胞悬浮液25ul,充分振荡后
置于室温;每5min观察一次,15~30min后判定结果,并作好记录。

表二 禽副粘病毒血凝抑制试验   (单位:ul)

┌──────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬────┬────┬────┬────┬───┬───┐
│ 孔号   │  1 │  2 │ 3  │  4 │ 5  │  6 │  7  │  8  │  9  │  10 │  11│  12│
│      │   │   │   │   │   │   │    │    │    │    │   │   │
├──────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│血清稀释度 │ 1∶2│ 1∶4│ 1∶8│1∶16 │1∶32 │1∶64 │ 1∶128│ 1∶256│ 阳性 │ 阴性 │抗原 │对照 │
├──────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│ 生理盐水 │  25│  25│  25│  25│  25│  25│  25 │  25 │  25 │  25 │  50│  75│
├──────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│ 被检血清 │  25│  25│  25│  25│  25│  25│  25 │  25 │  (25)│  (25)│   │   │
├──────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼────┼────┼────┼────┼───┼───┤
│ 4HA抗原  │  25│  25│  25│  25│  25│  25│  25 │  25 │  25 │  25 │  25│   │
└──────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴────┴────┴────┴────┴───┴───┘
		  室温感作5—6min                                           
┌──────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬────┬────┬────┬────┬───┬───┐
│ 1%红细胞 │  25│  25│  25│  25│  25│  25│  25 │  25 │  25 │  25 │  25│  25│
└──────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴────┴────┴────┴────┴───┴───┘
		  室温15min,每5min观察一次                                       
┌──────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬────┬────┬────┬────┬───┬───┐
│ 判定举例 │  - │ -  │ -  │ -  │ -  │  - │ +   │   + │  +  │  +  │  + │  + │
└──────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴────┴────┴────┴────┴───┴───┘


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