【甲醛残留量测定】 按现行《中国兽药典》进行测定,应符合兽用生物制品检验的一般规定。
【规格】 (1)20ml/瓶 (2)100ml/瓶 (3)250ml/瓶
【贮藏与有效期】 2~8℃保存,有效期为12个月。
附注
1 易感鸭的判定标准
试验鸭采血,提取血清,用鸭疫里默氏菌平板凝集试验抗原和大肠杆菌平板凝集试验抗原分别进行平板凝集试验,均未出现凝集者,即为易感。
1.1 鸭疫里默氏菌平板凝集试验用抗原制备
1.1.1 菌液的培养 将冻干的鸭疫里默氏菌WF株接种于含2%犊牛血清的马丁肉汤,37℃培养24小时;取样划线接种于含10%犊牛血清的巧克力琼脂平板,37℃、5%~10%CO2培养24小时,挑选符合标准的典型菌落接种于含10%犊牛血清的巧克力琼脂斜面,37℃、5%~10%CO2培养24小时,将琼脂斜面上的菌苔全部洗下接种于含1%裂解血球全血的马丁肉汤中,37℃培养24小时,培养期间振荡数次。
1.1.2 灭活与灭活检验 按菌液总量的0.3%比例缓慢加入10%甲醛溶液,经37℃灭活24~48小时,灭活期间每隔4~6小时搅拌一次。取样分别接种含1%裂解血球全血的马丁肉汤和含10%犊牛血清的巧克力琼脂平板,37℃培养24小时,应无菌生长。
1.1.3 离心洗涤 将灭活菌液进行离心(3000~5000rpm)20分钟,用生理盐水洗3次,最后一次的菌悬液进行适当稀释,用标准的细菌浊度管进行比对,根据含菌总数(CFU/ml)=稀释倍数×7.0×108CFU/ml,计算菌悬液中的含菌总数(CFU/ml)。
1.1.4 平板凝集试验用抗原的配制 根据菌悬液中的含菌总数,用灭菌生理盐水将菌悬液稀释成每ml含菌数1.0×109CFU,即为平板凝集试验用抗原。
1.1.5 平板凝集试验用抗原的检验 采用玻片凝集试验进行,将鸭疫里默氏菌菌体抗原滴加于干净玻片上,然后再滴加1滴1型鸭疫里默氏菌阳性血清(血清效价≥1:32),用接种环将抗原和血清充分混合,2分钟观察结果,如出现清晰的乳白絮状凝集,即判合格,同时设置生理盐水对照,应无凝集发生。
1.2 大肠杆菌平板凝集试验用抗原制备
1.2.1 菌液制备 将冻干的大肠杆菌BZ株(血清型O78)接种于马丁肉汤,37℃培养24小时,然后划线接种麦康凯琼脂平板,37℃培养24小时,选择粉红色或砖红色、菌落隆起、表面光滑、边缘整齐的菌落,接种普通琼脂斜面,37℃培养24小时,用生理盐水将琼脂斜面上的菌苔洗涤下来,装入分装瓶中。
1.2.2 高压灭活 将洗涤下来的菌液置高压锅进行灭活,120℃高压2小时。
1.2.3 灭活菌悬液中菌数的确定 用灭菌生理盐水对灭活后的菌液进行适当稀释,用标准的细菌浊度管进行比对,根据含菌总数(CFU/ml)=稀释倍数×8.0×108CFU/ml,计算灭活菌液中的含菌总数(CFU/ml)。
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