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【效价测定】 按附注2.2.1项测定HA效价，应不低于1：128。
【作用与用途】 用于检测鸡传染性支气管炎病毒抗体的血凝抑制试验。
【注意事项】 使用时应将抗原充分摇匀。
【规格】 1ml/瓶
【贮藏与有效期】 -20℃以下保存，有效期为18个月。
2 鸡传染性支气管炎HI试验操作术式
2.1 试验材料
2.1.1 IB HI抗原 系用IBV M41株病毒液经100倍浓缩后加入A型魏氏梭菌滤液处理制成。
2.1.2 试剂
2.1.2.1 HA缓冲液 将5.96g HEPES、8.19g氯化钠、0.15g氯化钙依次溶解纯化水中至1000ml，用0.1mol/L氢氧化钠溶液或盐酸溶液调至pH值6.5，用0.2mm微孔滤器滤过，分装，置2～8℃保存备用。
2.1.2.2 生理盐水 取9g氯化钠溶解纯化水中至1000ml。
2.1.2.3 红细胞悬液 采集公鸡血液（加入阿氏液抗凝），加入生理盐水，离心，洗涤5次，最后用HA缓冲液将血球泥稀释至1%（V/V）。
2.1.2.4 25%高岭土悬液 取高岭土25g，加纯化水至100ml，再加入0.1mol/L盐酸溶液 250ml，摇匀，静置60分钟，弃上清，用注射用水反复洗涤至中性，置37℃，直至水份完全蒸发，用PBS（0.01mol/L，pH值7.2）配成25%悬液，置2～8℃保存备用。
2.2 IB HI工作抗原的制备
2.2.1 IB HI抗原效价测定
2.2.1.1 在96孔微量板上，从第1孔至第12孔，用加液器每孔加入HA缓冲液25ml。
2.2.1.2 取25mlHI抗原，从第1孔起，依次作2倍系列稀释至第12孔，混合，弃去25ml。
2.2.1.3 每孔加入25ml HA缓冲液。
2.2.1.4 每孔加入25ml 1%鸡红细胞悬液，每块板上设稀释液和红细胞悬液对照孔。
2.2.1.5 将微量板置振荡器上振荡30秒，置2～8℃作用45分钟，判定结果。判定时，将微量板倾斜45度。对照孔的红细胞完全沉淀到孔底中心，呈泪珠样流淌，HA阳性孔的红细胞则均匀分布于孔底或呈锯齿样凝集。使红细胞完全凝集的最大稀释倍数为该抗原的HA效价。
2.2.2 IB HI工作抗原的配制 如果IB HI抗原凝集价测定结果为1：1024（举例），则4个HA单位为1：256（1024÷4＝256），这时可将HI抗原用HA缓冲液稀释256倍，即成4 HA单位的工作抗原液。
2.3 HI试验操作方法
2.3.1 待检血清的处理 取0.1ml血清，加入0.3ml 25%高岭土悬液，混匀，置37℃ 60分钟，以6000r/min离心15分钟，取上清，即为1：4稀释的待检血清。
2.3.2 HI试验操作方法
2.3.2.1 在96孔微量板上，每行从第2孔开始，每孔加入25mlHA缓冲液，直至第12孔。
2.3.2.2 分别在第1、2、12孔中加入处理过的待检血清25ml。
2.3.2.3 用加样器从第2孔起作2倍系列稀释，直至第10孔（血清稀释倍数从第1孔的1：4、第2孔的1：8……至第10孔的1：2048），弃去25ml。
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