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免疫攻毒法 用3～5周龄SPF鸡15只，其中10只各皮下或肌肉注射疫苗20ml（1/25羽份），另5只作对照。接种后21～28日，每只鸡各肌肉注射鸡新城疫病毒北京株（CVCC AV1611株）105ELD50，观察14日，对照组鸡应全部死亡，免疫组鸡应至少保护7只。
（2）鸡传染性支气管炎部分 用3～5周龄SPF鸡10只，点眼接种鸡传染性支气管炎活疫苗（H120）1羽份，接种后21日，分别采血，各皮下或肌肉注射灭活疫苗1羽份（0.5m1），21～28日后，再分别采血。将两次血清分别进行HI抗体效价测定（附注1和附注2）。二免血清的HI抗体效价几何平均值应不低于首免血清的4倍。
（3）减蛋综合征部分 用3～5周龄SPF鸡10只，每只皮下或肌肉注射疫苗1羽份（0.5ml），21日后，连同对照鸡5只，分别采血，分离血清，测定HI抗体效价，免疫鸡HI抗体效价几何平均滴度应不低于1：128，对照组鸡HI抗体效价均应不高于1：4。
（4）禽流感部分 以下方法任择其一。
血清学方法 用3～5周龄SPF鸡15只，其中10只各颈部皮下或肌肉注射疫苗0.3m1，另5只作对照。接种后21～28日，每只鸡分别采血，分离血清，用禽流感病毒H9亚型抗原测定HI抗体（见附注3和附注4）。免疫组鸡HI抗体效价的几何平均值应不低于1：90，未免疫对照组鸡HI抗体效价均应不高于1：4。
免疫攻毒法 用3～5周龄SPF鸡15只，其中10只各颈部皮下或肌肉注射疫苗0.3m1，另5只作对照。接种后21～28日，用1∶10稀释的H9亚型AIV WD株毒种进行翅静脉注射，每只鸡0.5m1。攻毒后第5日，分别采集每只鸡的泄殖腔及气管拭子，将同一只鸡的泄殖腔及气管拭子混合后作为1个样品，每个样品经尿囊腔接种9～11日龄SPF鸡胚5枚，每胚0.2ml，孵育观察5日，逐胚测定鸡胚液的HA效价。每个样品接种的5枚鸡胚中只要有1枚鸡胚的鸡胚液HA效价不低于1∶16（微量法），即可判为病毒分离阳性。对病毒分离阴性的样品，应盲传1次后再进行判定。免疫组鸡应至少有9只病毒分离阴性，对照组鸡应至少有4只病毒分离阳性。
【甲醛、汞类防腐剂残留量测定】 按现行《中国兽药典》附录进行测定，应符合规定。
【规格】 （1）100ml/瓶 （2）250ml/瓶 （3）500ml/瓶
【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为18个月。
附注
1 鸡传染性支气管炎血凝抑制试验（HI）抗原质量标准
本品系用鸡传染性支气管炎病毒（IBV）M41株接种易感鸡胚培养，收获感染胚液，经超速离心浓缩后，经A型魏氏梭菌滤液处理制成。用于检测鸡传染性支气管炎病毒抗体。
【性状】 白色混浊液体，底部有少量沉淀。
【装量检查】 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合规定。
【特异性检验】 将IB、ND、AI（H9亚型）、EDS、IBD阳性血清及SPF鸡血清按附注2.3.1项处理后，与本抗原进行血凝抑制试验。IB阳性血清HI抗体效价应不低于1：128，ND、AI（H9亚型）、EDS、IBD阳性血清及SPF鸡血清HI抗体效价均应不高于1：8。
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