【贮藏与有效期】 2~8℃保存,有效期为120个月。
2 鸡传染性支气管炎血凝抑制试验操作术式
2.1 鸡传染性支气管炎HI抗原工作液配制
2.1.1 鸡传染性支气管炎HI抗原血凝价测定 取96孔V型微量反应板1块,每孔加25μl PBS(0.01mol/L,pH值7.0~7.4),第一排加25μl抗原,并做2~4个重复孔,然后将抗原进行2倍系列稀释,稀释后每孔再加入25μl PBS,最后再加入1%鸡红细胞悬液25μl,用微量振荡器混匀,在2~8℃下静置40分钟后判定结果。以使100%红细胞凝集的抗原最高稀释倍数作为判定终点。
2.1.2 4HA单位抗原的配制 根据测定的HI抗原HA效价,用PBS配制4HA单位抗原。将配制好的4HA单位抗原用PBS稀释,使其稀释度为1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7。在每一稀释度的25μl抗原中加25μl PBS,再加入1%鸡红细胞悬液25μl,混匀,在2~8℃下静置40分钟后判定结果。如果1:4稀释为100%红细胞凝集终点,表明配制的是4HA单位抗原;如果100%红细胞凝集终点是1:5或1:6,表明配制的4HA单位抗原实际上是高于4个单位;如果100%红细胞凝集终点是1:2或1:3,表明配制的4HA单位抗原实际上是低于4个单位。应根据检验结果适当调整,使抗原工作液为4HA单位。
2.2 HI试验
2.2.1 取96孔V型微量反应板,每孔加25μl PBS。
2.2.2 分别吸取25μl待检血清,加至每块板的第一排各相应孔内,并在每块板上设标准阳性血清和阴性血清对照,然后作2倍系列稀释。
2.2.3 分别向各孔中加入含4HA单位的抗原25μl,在2~8℃下静置30分钟。
2.2.4 每孔中加入1%(V/V)鸡红细胞悬液25μl,轻轻混匀,在2~8℃下静置40分钟。
2.2.5 结果判定 将反应板倾斜,凡血清反应孔与红细胞对照孔中红细胞以同样速度从孔底流淌者判为血凝抑制。当阴性血清HI效价不高于1∶8、阳性血清HI效价与已知效价相比误差不超过1个滴度时,方可成立。以完全抑制4HA单位抗原的血清最高稀释度作为HI效价。
(二)鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(LaSota株+M41株+SY株)说明书
【兽药名称】
通用名 鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9 亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SY株)
商品名 无
英文名 Newcastle Disease, Infectious Bronchitis and Avian Influenza (H9Subtype) Vaccine, Inactivated (Strain La Sota+Strain M41+Strain SY)
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