流动相:乙腈+0.1mol/L醋酸铵缓冲溶液(冰醋酸调pH至5.0)(70+30);
流速:1.0 mL/min;
检测波长:260nm;
柱温:25℃;
进样量:20L。
5.2.2 测定方法
取标准工作溶液分别进样,以目标峰面积为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标进行线性回归,建立三条标准工作曲线。取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样,根据测定成分的峰面积,分别代入三条标准工作曲线上,得出十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基二甲基苄基氯化铵的质量浓度。按“6计算”,计算样品中苯扎氯铵的含量。
5.3 平行实验
按以上步骤操作,对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
6 计算
W=[D(pc
12+ pc
14+ pc
16)V]/ m*10
6*100
式中:
w --化妆品中苯扎氯铵的质量分数,%;
m -- 样品取样量,g;
pc
12-- 从标准工作曲线上查得的待测样液中十二烷基二甲基苄基氯化铵的质量浓度,mg/mL;
pc
14-- 从标准工作曲线上查得的待测样液中十四烷基二甲基苄基氯化铵的质量浓度,mg/mL;
pc
16-- 从标准工作曲线上查得的待测样液中十六烷基二甲基苄基氯化铵的质量浓度,mg/mL;
V -- 样品定容体积,mL;
D -- 稀释倍数。
7 回收率与精密度
方法的回收率为91.3%~104.4%,相对标准偏差小于6%(n=6)。
8 色谱图
图 苯扎氯铵标准溶液的高效液相色谱图(略)
色谱峰:1.十二烷基二甲基苄基氯化铵;2.十四烷基二甲基苄基氯化铵;3.十六烷基二甲基苄基氯化铵苯扎氯铵
附件12:
化妆品中羟基喹啉的检测方法
1 适用范围
本方法规定了采用液相色谱法测定化妆品中羟基喹啉(CAS:148-24-3)的方法。
本方法适用于发用类化妆品中羟基喹啉的测定。
2 方法提要
样品在经过提取后,经高效液相色谱仪分离,二极管阵列检测器检测,峰面积定量,以标准曲线法计算含量。本方法对羟基喹啉的检出限为0.0002mg,定量下限为0.0006mg。若取0.25g样品,本方法对羟基喹啉的检出浓度为2.5mg/g,最低定量浓度为7.5mg/g。
3 试剂和材料
除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为一级实验用水。
3.1 甲醇,色谱纯。
3.2 羟基喹啉,纯度≥99.5%。
3.3 癸烷磺酸钠,色谱纯。
3.4 羟基喹啉标准储备液:取羟基喹啉0.05g,精确到0.0001g,置50 mL棕色容量瓶中,用甲醇(3.1)溶解并定容,摇匀,配成质量浓度为1 g/L的标准储备溶液。
3.5 羟基喹啉标准工作溶液:配制浓度分别为1mg/mL、10mg/mL、30mg/mL、50mg/mL、80mg/mL和100mg/mL的羟基喹啉标准工作溶液。
4 仪器
4.1 高效液相色谱仪:具有二极管阵列检测器。
4.2 涡旋振荡器。
4.3 超声波清洗器。
4.4 分析天平:感量0.0001g。
4.5 分析天平:感量0.001g。
5 测定步骤
5.1 样品前处理
称取样品0.25g,精确至0.001g,置于25mL具塞刻度管中,加入20 mL甲醇(3.1),涡旋振荡1 min,超声(功率:400W)提取15 min,取出,冷却至室温后用甲醇(3.1)定容至25mL,混匀,取上层液经0.45 mm滤膜过滤,滤液作为待测样液,备用。
5.2 测定
5.2.1 色谱条件
色谱柱:C
18 柱,250 mm×4.6mm,5 mm;
流动相:甲醇+0.01moL/L癸烷磺酸钠(磷酸调pH至2.25)(60+40);
流速:1.0 mL/min;
检测波长:240nm;
柱温:25℃;
进样量:20mL。
5.2.2 测定方法
取标准工作溶液分别进样,以峰面积为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标进行线性回归,建立标准工作曲线。取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样,根据测定成分的峰面积,代入标准工作曲线上得出羟基喹啉的质量浓度。按“6计算”,计算样品中羟基喹啉的含量。
5.3 平行实验
按以上步骤操作,对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
6 计算
W=(DrV/ m*10
6)*100
式中:w--化妆品中羟基喹啉的质量分数,%;
m-- 样品取样量,g;
r-- 从标准工作曲线上查得的待测样液中羟基喹啉的质量浓度,mg/mL;
V -- 样品定容体积,mL;
D -- 稀释倍数。
7 回收率与精密度
方法的回收率为95.5%~112%,相对标准偏差小于6%(n=6)。
8 色谱图
图 羟基喹啉标准溶液的高效液相色谱图(略)
附件13:
化妆品中过氧化氢的检测方法
1 适用范围
本方法规定了采用高效液相色谱法测定化妆品中过氧化氢(CAS:7722-84-1)含量的方法。
本方法适用于染发剂、膏状面膜中过氧化氢含量的测定。
2 方法提要
试样采用水浸提,部分上清液与三苯基膦衍生反应,衍生溶液经滤膜过滤,用液相色谱分离,紫外检测器检测,峰面积定量,以标准曲线法计算含量,得到样品中过氧化氢的含量。本方法对过氧化氢的检出限为0.0012μg,定量下限为0.004μg。若取0.2g样品,过氧化氢的最低检出浓度为60μg /g,最低定量浓度为200μg /g 。
3 试剂和溶液
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为一级实验用水。
3.1 乙腈,色谱纯。
3.2 三苯基膦溶液,称取三苯基膦1.3g,用乙腈(3.1)溶解,定容至25mL,浓度为0.2mol/L,现用现配。
3.3 氧化三苯基膦溶液,称取氧化三苯基膦0.0003g,用乙腈(3.1)溶解,定容至100mL,浓度为0.00001mol/L。
3.4 过氧化氢,浓度为3%,使用前需要进行标定,标定方法见附录。
3.5 过氧化氢标准储备液:称取标定过的过氧化氢对照品(3.4)1.5g,精确到0.0001g,置于25 mL棕色容量瓶中,用水定容,摇匀,配制成质量浓度为1.8mg/mL的标准储备溶液。
3.6 过氧化氢标准工作液:配制浓度分别为3.6mg/L、9.0 mg/L、18mg/L、36 mg/L、54 mg/L、90 mg/L、180 mg/L的标准工作液。
4 仪器和设备
4.1 高效液相色谱仪:具有二极管阵列检测器。
4.2 涡旋振荡器。
4.3 分析天平:感量0.0001g。
4.4 分析天平:感量0.001g。
5 分析步骤
5.1 样液的制备
5.1.1 样品前处理
称取样品约0.05g~0.2g(精确至0.001g),含过氧化氢3%以下称取0.2g,含过氧化氢3%~6%称取0.1g,含过氧化氢6%~12%称取0.05g,置于100mL容量瓶中,加入约50 mL水,振摇至样品完全溶解,用水定容,摇匀备用。面膜等半固体样品可以称取样品于50mL烧杯,加入约20mL,用玻璃棒将样品搅碎,用水转移至100mL容量瓶中,定容,摇匀备用。
5.1.2 衍生化反应
分别移取过氧化氢标准工作液(3.6)和样液(5.1.1)各1mL于10mL棕色容量瓶中,加入1mL三苯基膦乙腈溶液(3.2),振摇,继续加入5mL乙腈(3.1),振摇,用水定容,摇匀。置于暗处室温反应30min。
5.2 测定
5.2.1 色谱参考条件