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B3.1.2.8 在各凹孔中加入2mol/L硫酸（H（下标始）2（下标终）SO（下标始）4（下标终））0.05mL以中止反应。
B3.1.2.9 在酶标专用比色计上读取492nm光密度（OD）值。
B3.1.2.10 每次实验均设阳性参考血清对照，同法求出其OD值。以此对样本血清OD值进行校正。
B3.1.3 反应标准：据Dynatech酶标专用比色计测定结果OD值≥0.5为血吸虫阳性。
B3.2 使用纯化抗原的ELISA法
B3.2.1 抗原：经50％～75％饱和硫酸铵纯化的日本血吸虫虫卵可溶性抗原（AEA）。
B3.2.2 操作方法：
B3.2.2.1 已包被AEA抗原的40孔聚苯乙烯塑料板用前以PBS/T（pH7.4）洗涤1次。
B3.2.2.2 血清用PBS/T稀释成1∶200，每孔加0.1mL，每份血清加2个孔，置有盖湿盒内，20-37℃温育30min。
B3.2.2.3 去尽反应板孔内的液体，用PBS/T灌满各孔，3～5min后去尽孔内液体，如此反复洗涤3次。
B3.2.2.4 每孔加1∶1000稀释辣根过氧化物（HRP）酶结合物0.1mL，同B3.2.2.2～B3.2.2.3温育和洗涤。
B3.2.2.5 加OPD底物溶液（OPD20mg＋pH5.0柠檬酸磷酸盐缓冲液50mL，用前加30％H（下标始）2（下标终）O（下标始）2（下标终）20μL）0.1mL，同B3.2.2.2温育。
B3.2.2.6 每孔加2mol/LH（下标始）2（下标终）SO（下标始）4（下标终）25μL，终止反应。
B3.2.2.7 用酶标检测仪读取492nm的消光值。每份标本求出2孔实测的OD平均值，再用标准血清予以校正。
B3.2.3 反应标准：每次每板标准血清的OD值应控制在0.79～1.15范围，若达不到此质控范围，应重测试。
标本OD值≥0.5判为阳性。
B3.3 PVC薄膜快速酶联免疫吸附法（ELISA）
B3.3.1 抗原：日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）与8mol/L尿素溶解性虫卵抗原（JEU）等量混合。
B3.3.2 操作方法：
B3.3.2.1 实验前先在已包被抗原的PVC薄膜背面编号，洗涤液（0.05％吐温盐水）洗一次，然后每孔加PBS/T0.2mL。
B3.3.2.2 按编号加入待测血清及参考血清（每批作一个阴性对照，一个阳性对照），每孔10μL，混匀，置37℃ 5min（如放25℃室温，则10min）。
B3.3.2.3 孵育后，倾去稀释血清，用洗涤液连续洗8次，控干。
B3.3.2.4 加入按工作浓度稀释的酶结合物，每孔0.2mL放37℃ 5min。
B3.3.2.5 倾去酶结合物，先用洗涤液洗8次，再用蒸馏水洗一次，控干。
B3.3.2.6 加入已加3％H（下标始）2（下标终）O〈sub〉2（下标终）的四甲基联苯胺（TMBS）底物液，每孔0.2mL，反应5～10min即可观察结果。
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