原理:所用抗原是心磷脂、卵磷脂和胆固醇的乙醇溶液。梅毒螺旋体破坏人体组织过程中,在体内释放出一种抗原性心磷脂,能刺激机体产生反应素,该反应素与从牛心中提取的心磷脂在体外可发生抗原抗体反应。卵磷脂的作用是加强心磷脂的抗原性,胆固醇可增强抗原的敏感性。心磷脂与卵磷脂遇水形成胶体溶液,胆固醇遇水析出结晶,反应时结晶成为载体(核心),在载体或核心的周围,包裹了一层心磷脂和卵磷脂,形成一种胶体微粒,这种微粒遇到梅毒血清抗体(IgG、IgM),即粘附在胶体微粒的周围,形成疏水性薄膜,由于摇动、碰撞,使颗粒与颗粒互相粘附而形成肉眼可见的颗粒凝集和沉淀,即为阳性反应;如遇到非梅毒血清,因体液中的白蛋白多于球蛋白,而白蛋白对胶体颗粒有保护作用,形成亲水性薄膜,即使同样摇动、碰撞,由于抗原颗粒周围没有粘附免疫球蛋白的作用,不能形成较大颗粒,无肉眼可见的凝集和沉淀,因此为阴性反应。
B1.1 VDRL玻片试验
B1.1.1 VDRL玻片定性试验
B1.1.1.1 待查血清56℃水浴中灭活0.5h,吸取50μL血清加在玻片圆圈中。
B1.1.1.2 用1mL注射器装上针头吸取抗原悬液滴加1滴。
B1.1.1.3 用手或机械转动器(每分钟180次)摇动玻片4min。
B1.1.1.4 立即按以下标准判断结果:
(2+~3+)肉眼可观察到大或中等块状凝集物,为阳性。
(1+)肉眼可观察到小块状物,液体混浊,需用100倍显微镜观察,为弱阳性。
(-)在镜下仅见微小抗原颗粒,无凝集物,为阴性。
B1.1.2 VDRL玻片定量试验
为观察疗效,应作定量试验:为排除“前带现象”亦应用玻片定量试验。
待测血清用等渗盐水在试管中作6个稀释度:原血清、1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32,再按定性试验方法进行测定和判断结果。
B1.2 RPR 试验
优点:RPR抗原中加入活性炭颗粒,试验在特制的白色纸卡上进行,在白色底板上出现黑色凝集颗粒或絮片为阳性反应。该试验结果容易判断,肉眼即可观察,血清不须灭活,也可用血浆进行检测。
B1.2.1 RPR定性试验
B1.2.1.1 在卡片圆圈中加入50μL待检血清,并扩大到整个圆圈。
B1.2.1.2 用滴管和专用针头,加1滴RPR抗原悬液。
B1.2.1.3 用手或机械转动器(每分钟100次)转动卡片8min。
B1.2 .1.4 立即按以下标准判断结果:
阳性反应:在圆圈中可见不规则大小黑色凝集块。
阴性反应:在圆圈中无黑色凝集块,仅见均匀的不凝集现象(呈亮灰色)。
该试验仅报告“阳性”或“阴性”,任何程度的阳性反应都需作定量试验。
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